蛋白質凍干保護(hu)劑有哪些(xie)？

為什(shen)么現在越來(lai)越多(duo)的公司趨向于(yu)將各種(zhong)蛋白凍(dong)干(gan)吶？主要因(yin)(yin)為干(gan)粉狀(zhuang)態下蛋白的穩(wen)定(ding)性(xing)更高，而且要比液體試(shi)劑(ji)容(rong)易(yi)運輸與儲存，因(yin)(yin)此(ci)蛋白凍(dong)干(gan)已成(cheng)為一個大的趨勢。

由于生物(wu)物(wu)料(liao)中(zhong)活(huo)性(xing)組分各不(bu)相(xiang)同，因而(er)一般均須針(zhen)對(dui)物(wu)料(liao)單獨配(pei)方(fang)。為了確(que)保生物(wu)制品冷(leng)凍干燥后很大程度地獲得活性(xing)(xing)恢復(fu)率，必須充分(fen)考(kao)慮各種保護劑(ji)和添加劑(ji)與生物制品活性(xing)(xing)組分(fen)之間的最大相容性(xing)(xing)。

主要分為五大類：

一、pH值

由于蛋白質(zhi)只(zhi)有在(zai)很小的(de)pH值范(fan)圍內才是(shi)穩定的；并且(qie)不同的pH環境會(hui)影響(xiang)某些蛋白質的溶解(jie)性。所以(yi)，選擇的pH環境有(you)利于蛋白質的穩(wen)定性和它在(zai)溶液中的溶解性。例如，在中性環境中凍結卵清蛋白(bai)(bai)，不會導致(zhi)蛋白(bai)(bai)質變性，但在pH=1.9環(huan)境下，蛋(dan)白(bai)質(zhi)的(de)(de)結構發(fa)生了明顯的(de)(de)變化。

二(er)、緩沖(chong)劑， 有許多緩沖劑能(neng)(neng)夠用于(yu)生物制(zhi)品的冷凍干燥配方中(zhong)，但是(shi)，并(bing)非每一種(zhong)緩沖劑都能(neng)(neng)夠用于(yu)任何(he)溶液(ye)，例如，對pH敏(min)感的蛋白質溶液，就應當避免(mian)使用磷(lin)酸(suan)鈉緩沖劑(ji)，這是由于在(zai)凍結過程(cheng)中，Na,HPO,易(yi)于優(you)先結(jie)晶，使得溶液的pH值降低，最終引起蛋白質變(bian)性。

另(ling)外，正確(que)選擇緩(huan)沖劑(ji)的濃度也是(shi)很(hen)重要的。例如，B-牛乳糖(tang)水溶液 (2ug/ml)冷(leng)凍干燥過程中，因(yin)為(wei)(wei)甘露醇結晶而不能(neng)起到保(bao)護(hu)作用(yong)。當(dang)添加濃度為(wei)(wei)10mM的(de)磷酸鹽緩沖(chong)液 (pH7.4)后(hou)部分(fen)抑(yi)制了甘露醇的結晶，并(bing)且酶的活性達到95%:而將磷酸鹽緩沖(chong)液 (pH7.4)的濃度提高到200mM就能夠抑制甘露醇結晶。

二、填充劑(ji)(ji)，為了(le)保證凍干品形(xing)成良好的(de)(de)結構防止產(chan)品坍塌，同時也為了(le)增加配方(fang)的(de)(de)溶解(jie)性，所以填充劑(ji)(ji)必須是充分可溶并且是與蛋白是相容的(de)(de)，常(chang)用的(de)(de)填充劑(ji)(ji)是甘(gan)露醇、甘(gan)氨酸，牛血清白蛋白等。

三、糖(tang)類，糖(tang)類是蛋(dan)白(bai)(bai)凍干過程中的(de)(de)賦形劑，因(yin)為糖(tang)類物質中含有較多(duo)的(de)(de)羥基，可以(yi)取(qu)代蛋(dan)白(bai)(bai)質與(yu)水(shui)之間(jian)的(de)(de)氫鍵來提(ti)供穩定(ding)作用(yong)，一般是雙糖(tang)，如蔗(zhe)糖(tang)和海藻(zao)糖(tang)。

四、其他

目(mu)前(qian)，已經有超過50%的(de)蛋(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)(zhi)藥(yao)物(wu)產品選擇冷凍干燥(zao)(zao)，因(yin)為(wei)在(zai)固態下，蛋(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)(zhi)藥(yao)物(wu)的(de)物(wu)理和化學(xue)降解減少，從而保(bao)證了(le)其長(chang)期穩定性(xing)。不(bu)(bu)同(tong)(tong)結構(gou)和性(xing)質(zhi)(zhi)(zhi)的(de)冷凍干燥(zao)(zao)保(bao)護(hu)(hu)劑(ji)對(dui)(dui)冷凍干燥(zao)(zao)的(de)不(bu)(bu)同(tong)(tong)階段保(bao)護(hu)(hu)蛋(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)(zhi)的(de)保(bao)護(hu)(hu)機(ji)制(zhi)不(bu)(bu)同(tong)(tong)，聯(lian)合使用(yong)(yong)時對(dui)(dui)某些蛋(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)(zhi)有協同(tong)(tong)保(bao)護(hu)(hu)作用(yong)(yong)，所以(yi)，了(le)解常用(yong)(yong)凍保(bao)護(hu)(hu)劑(ji)種類和性(xing)質(zhi)(zhi)(zhi)對(dui)(dui)于開發更有效的(de)蛋(dan)白(bai)制(zhi)制(zhi)劑(ji)至(zhi)關重要的(de)。